Embora Fumonisina B1 (FB1) seja uma micotoxina pouco estudada em trigo, os fungos do gênero Fusarium são frequentemente detectados neste cereal, principalmente em regiões subtropicais, como o Sul do Brasil, o que justifica a necessidade de avaliar sua ocorrência. Neste estudo, foram avaliadas a micobiota, atividade de água e a presença de FB1 em 11 cultivares de trigo cultivados nas regiões nordeste e noroeste do Rio Grande do Sul. A micobiota foi identificada por técnicas morfológicas e moleculares e a FB1 foi determinada por cromatografia líquida e detecção por fluorescência (HPLC-FL). Nas amostras analisadas, foi verificada uma contagem inferior a 103UFC, e os fungos dos gêneros Phoma, Cladosporium e Fusarium foram os mais frequentes. Apesar disso, 54% das amostras estavam contaminadas com FB1 em níveis variando de 958 a 4906µg de FB1 kg-1.

Although fumonisin B1 (FB1) is a mycotoxin poorly studied in wheat, the Fusarium genus fungi have been frequently detected in this cereal, especially in subtropical regions such as southern Brazil, thus studies on their occurrence are required. This study evaluated the mycobiota, water activity and the presence of FB1 in 11 wheat cultivars grown in the northeastern and northwestern of Rio Grande do Sul. The mycobiota was identified by morphological and molecular techniques and FB1 was determined by liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FL). Microbial counts lower than 103CFU were found in the samples, and the fungi genera Phoma, Cladosporium and Fusarium were the most frequent. Despite this, 54% of the samples were contaminated with FB1 at levels ranging from 958 to 4,906µg FB1 kg-1.

Aspergillus flavus é um fungo filamentoso que pode produzir aflatoxinas e ácido ciclopiazônico, sendo que a presença dessas micotoxinas em alimentos e rações pode levar a um efeito tóxico no homem e em animais. Cepas de A. flavus produtoras de aflatoxinas e ácido ciclopiazônico são frequentemente isoladas do amendoim, indicando a natural co-ocorrência dessas toxinas neste substrato. Neste estudo, foram isoladas 47 cepas de Aspergillus flavus em grãos e cascas de amendoim durante diferentes fases de maturação do fruto e também durante seu armazenamento. Das cepas isoladas, foram avaliados os potenciais para produção de aflatoxinas e ácido ciclopiazônico, em que 91,5% foram produtoras de aflatoxinas e 70% produziram ácido ciclopiazônico, sendo que 63,8% produziram ambas as toxinas e 2,1% não produziu nenhuma. A presença de cepas toxigênicas de A. flavus nas amostras de amendoim analisadas indica um risco potencial da contaminação deste produto, caso seja exposto a condições ambientais favoráveis ao crescimento do fungo e produção de micotoxinas.

Aspergillus flavus is a filamentous fungus that can produce aflatoxins and cyclopiazonic acid, and the presence of these mycotoxins in food and feed can lead to a toxic effect on humans and animals. Strains of A. flavus producing aflatoxin and cyclopiazonic acid are often isolated from peanuts, indicating the the co-occcurrence of these toxins in the natural substrate. In this study, we isolated 47 strains of A. flavus on peanut kernels and hulls during different stages of fruit ripening and its storage. Of the isolated strains, we assessed the potential for aflatoxin and cyclopiazonic acid production, in which 91.5% could produce aflatoxins and 70% produced cyclopiazonic acid; 63.8% produced both toxins and 2.1% produced no toxin. The presence of toxigenic A. flavus strains in peanut samples indicate a potential risk of contamination of these products, if they are exposed to environmental conditions that are favorable to fungal growth and mycotoxin production.

As cascas de amendoim (Arachis hypogaea L.) são de grande importância para confecção de cama de frangos, de gado de leite e como fonte de fibras para ruminantes, portanto a elucidação dos mecanismos de contaminação por fungos toxigênicos e por micotoxinas em amendoim é imprescindível, especialmente para que medidas preventivas possam ser tomadas. Realizou-se, este trabalho, em Junqueirópolis, Estado de São Paulo, Brasil. Os principais fungos isolados nas cascas de amendoim foram Fusarium ssp. (78,75 %), Rhizopus ssp. (14,1 %) e A. flavus (11,75 %). No solo foram isolados Penicillium spp., Fusarium spp. e Aspergillus flavus, entre outros. Aflatoxinas foram detectadas em amostras de cascas de amendoim a partir do estágio de granação em concentrações que variaram de 5,42 μg/kg a 218,52 μg/kg. Ácido ciclopiazônico e fumonisinas B1 e B2 não foram detectadas. A presença de A. flavus e aflatoxinas nas amostras, revela a importância de um controle das cascas de amendoim antes de sua utilização. Boas práticas agrícolas são indicadas para região, uma vez que a contaminação das vagens ocorreu antes da colheita.

Peanut (Arachis hypogaea L.) hulls are very important because they are used as litter to poultry and dairy cattle and as fiber source to cattle. The elucidation of the peanuts contamination mechanisms by toxigenic fungi and their mycotoxins is vital, specially for prevention measurements. The peanuts total mycoflora and mycotoxin contamination were analyzed in plants sampled in Junqueirópolis, in São Paulo State (Brazil) at different stages of the pod maturity. The prevalent mycoflora in peanut hulls were Fusarium spp., Rhizopus spp. and Aspergillus flavus. In soil under the peanut crop, the genus Penicillium spp., Fusarium spp. and A. flavus were detected. Aflatoxins were detected in peanut hull samples since filling pod stage in concentrations from 5.42 μg/kg to 218.52 μg/kg. Cyclopiazonic acid and fumonisins were not detected. The A. flavus presence and the detection of aflatoxins indicate the importance of quality control of peanut hulls before their utilization, and the adoption of agricultural practices showed to avoid the contamination since the peanut pods contamination happened before the harvest.

Um dos fungos mais importantes atualmente em grãos armazenados é o Aspergillus flavus, o qual produz aflatoxinas. Este fungo pode crescer em diversos substratos e representa uma séria preocupação em saúde pública e nutrição animal. Portanto, o estudo de técnicas que possam ser aplicadas no controle das aflatoxinas é de grande importância. Assim sendo, o objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos da radiação gama no crescimento de Aspergillus flavus Link e na degradação das aflatoxinas B1 e B2, (AFB1 e AFB2) em umidade relativa (UR) de 97-99% e atividade de água (Aa) de 0,88-0,94. Amostras de grãos de milho foram irradiadas, utilizando-se uma fonte de Cobalto 60, emissora de raios gama, com as doses de 2; 5 e 10 kGy. A irradiação foi efetiva na redução do número de Unidades Formadoras de Colônias de A. flavus, por grama, nas amostras de milho analisadas. Adicionalmente, o teste de viabilidade fluorescente (solução de diacetato de fluoresceína e brometo de etídio) revelou diminuição no número de células viáveis com o aumento das doses de irradiação e três diferentes padrões de fluorescência. Além disso, a irradiação induziu a uma parcial redução dos níveis de AFB1 e AFB2, nas doses de 2 e 5 kGy, ao passo que uma completa degradação das aflatoxinas foi observada no ensaio empregado com 10 kGy.

One of the currently most important fungi in stored grains is Aspergillus flavus, which produce aflatoxins. This fungus can grow on diverse substrates and represents a serious public health and animal nutritional problem. Therefore, the study of techniques that can be applied to the control of aflatoxins is of great importance. The objective of the present study was to determine the effects of gamma radiation on the growth of Aspergillus flavus Link and on degradation of aflatoxin B1 and B2 (AFB1 and AFB2) at a relative humidity of 97 99% and a water activity (Aw) of 0.88-0.94. Samples of corn grains were irradiated using a cobalt 60 source emitting gamma rays at doses of 2, 5 and 10 kGy. Irradiation was found to be effective in reducing the number colony-forming units of A. flavus, per gram, in the corn samples analyzed. In addition, the fluorescent viability test (fluorescein diacetate and ethidium bromide) revealed a decrease in the number of viable cells with increasing irradiation doses and three different fluorescence patterns. Furthermore, irradiation induced a partial reduction in AFB1 and AFB2 levels at the doses of 2 and 5 kGy, whereas complete degradation of aflatoxins was observed in the assay employing 10 kGy.

A produção de aflatoxinas por 59 cepas de Aspergillus flavus e fumonisinas por 35 cepas de Fusarium verticillioides isoladas de amostras de grãos de sorgo recém colhido (10 amostras) e armazenado (130 amostras), foram avaliadas. A detecção de aflatoxinas (AFB1 e AFB2) foi efetuada por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e fumonisinas (FB1 e FB2) foram analisadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os resultados demonstram a produção de AFB1 e AFB2 em 38 cepas (64,4%) de A. flavus cujos níveis variaram de 12,00 a 3282,50 µg/kg. Referente às cepas de F. verticillioides, 32 (91%) produziram FB1, nas concentrações de 0,12 a 5,38 µg/g. Baixos níveis de fumonisinas foram detectados em 2 cepas de F. proliferatum. A constatação da potencialidade toxígena das cepas de A. flavus (64,4%) e de F. verticillioides (91,5%) nesta investigação, revelam a importância da pesquisa de aflatoxinas e fumonisinas nas amostras de sorgo. Diante disto, sugere-se o controle rigoroso das condições de armazenamento de sorgo, visando minimizar a contaminação por fungos deteriorantes toxígenos, evitando riscos à saúde humana e animal.

Fifty-nine Aspergillus flavus and 35 Fusarium verticillioides strains, isolated from freshly harvested (10) and stored (130) Brazilian sorghum samples, were tested regarding their ability to produce aflatoxins (coconut milk agar) and fumonisins (rice culture), respectively. Aflatoxins B1 and B2 were detected by TLC, and fumonisins B1 and B2 were analyzed by HPLC. Thirty-eight (64.4%) A. flavus strains produced detectable levels of aflatoxins at concentrations ranging from 12.00 to 3282.50 µg/kg (AFB1 + AFB2), while thirty two (91%) F. verticillioides strains produced FB1 at concentrations ranging from 0.12 to 5.38 µg/g. Two F. proliferatum strains produced low fumonisin levels. The toxigenic potential of A. flavus (64.4%) and F. verticillioides (91.5%) strains observed in sorghum samples indicates that rigorous control should be directed at the storage conditions of these products to minimize contamination with toxigenic deteriorating fungi, preventing further hazard to human and animal health.

Os efeitos da exposição oral prolongada (28 dias) à fumonisina foram estudados em suínos jovens. Os animais foram divididos em três grupos experimentais e alimentados com ração ad libitum contendo: A) 0mg de FB1.kg-1 (controle); B) 10mg de FB1.kg-1; C) 30mg de FB1.kg-1. Os suínos foram observados duas vezes por dia; seus pesos e consumo alimentar foram registrados semanalmente. Entre o 20º e 24º dia de intoxicação, os suínos do tratamentos C apresentaram diminuição do consumo de ração e ganho de peso, sinais característicos de edema pulmonar, razão pela qual um animal foi levado a óbito aos 23 dias de intoxicação. Após 28 dias, os animais foram necropsiados e os órgãos submetidos a análises macroscópica, histopatológica e ao estudo da morfologia e histologia intestinal. Nos suínos que apresentaram sinais clínicos de intoxicação, observaram-se lesões pulmonares, hepáticas e diminuição de altura das vilosidades e profundidade das criptas e hiperplasia glandular em segmentos intestinais. Conclui-se, portanto, que substanciais perdas de produtividade podem ser induzidas em suínos alimentados com ração contaminada com baixos níveis de fumonisinas.

The effects of prolonged oral exposure (28 days) to fumonisin were studied in young pigs. Animals were divided into three experimental groups and fed ad libitum using ratio containing: A) 0mg of FB1.kg-1 (as control); B) 10mg of FB1.kg-1; C) 30mg of FB1.kg-1. Pigs were observed twice a day; their weights and feed intake were registered weekly. Between the 20th and 24th day of intoxication, pigs in group C presented a decrease in feed intake and weight gain, and showed characteristic signs of porcine pulmonary edema, which was the death cause of one of the animals in this group on the 23rd day of the trial. After 28 days, animals were necropsized, their organs were submitted to macroscopic and histopathological analyses, and to the study of intestinal morphology and histology. Among the pigs that showed clinic signs of intoxication, pulmonary and hepatic lesions were observed. In intestine segments, a decrease on the height of the villus and the depth of the crypts as well as an increase on gland proportion per epithelial tissue were observed. It was concluded that substantial productivity losses may be induced on pigs fed ration contaminated with low levels of fumonisins.

As fumonisinas são micotoxinas produzidas por fungos do gênero Fusarium, um dos principais fitopatógenos de grãos de milho. Isoladas em 1988, a partir de amostras de milho mofado proveniente de região com alta incidência de câncer do esôfago na África, foram relacionadas à ocorrência de leucoencefalomalácia eqüina e hidrotórax e edema pulmonar suíno, e outras patologias animais. A presente revisão aborda aspectos da ocorrência natural das fumonisinas em grãos de milho, características físico-química das moléculas e efeitos toxicológicos em eqüinos, suínos, aves e bovinos, além do provável mecanismo de ação das micotoxinas.

Fumonisins are micotoxins produced by a fungus of the genera Fusarium, one of the main fitopathogens that occur in maize. Isolated in 1988, from moudly corn samples in a high incidence area of esophageal cancer in Africa, fumonisins are related with several diseases including equine leucoencephalomalacia and porcine pulmonary edema and hydrothorax. The present review approaches the natural occurrence of fumonisins in maize, its physical and quimical molecular characteristics and toxicological effects in horses, porcine, poultry and cattle. This review also discusses the micotoxins pathophisiology.

Com frequência o dermatófito Microsporum canis está envolvido na etiologia da dermatofitose, podendo ser transmitido para o homem por cães e gatos. Neste estudo foi procedida inoculação experimental de M. canis em cobaias resultando em lesões em 100 % dos animais e o curso clínico consistiu de período de incubação, fase inflamatória e fase de resolução das lesões. O exame histopatológico de biópsias cutâneas revelou presença de infiltrado neutrofílico e edema; acantose, hiperqueratose e espongiose. Estas lesões tornaram-se menos acentuadas no 30.0 dia pós-inoculação. Esporos e hifas de M. canis foram detectadas em cortes histológicos corados com PAS (Ácido Periódico de Schiff). A combinação dos corantes fluorescentes diacetato de fluoresceína (DF) e brometo de etídio (BE), possibilitou uma adequada visualização das células fúngicas viáveis e não viáveis com evidenciação de seus caracteres morfológicos. Este modelo experimental representa um valioso instrumento para o estudo da patogênese da infecção por dermatófitos, para a avaliação da eficácia de drogas antifúngicas, podendo também ser utilizado em estudos sobre a imunologia das dermatofitoses e na determinação da morfogênese de dermatófitos.

Dermatophytosis is a zoonosis in whose etiology the dermatophyte Microsporum canis is frequently involved. The fungus can be transmitted to man by dogs and cats. In the present study, guinea pigs were experimentally inoculated with M. canis and the course of the lesions was evaluated. Inoculation resulted in lesions in 100% of the animals, with a clinical course consisting of an incubation period, an inflammatory and a phase of lesion resolution. The histopathologic evaluation of the skin biopsies revealed the presence of acanthosis, hyperkeratosis, spongiosis and marked dermal edema. M. canis spores and hyphae were detected in histologic sections stained with periodic acid-Schiff. The combination of the fluorescent dyes FD and EB permitted the adequate visualization of viable and dead fungal cells in skin fragments of guinea pigs inoculated with M. canis and the identification of the morphologic characteristics of the cells. This experimental model represents a valuable instrument for the study of the pathogenesis of dermatophytic infection with respect to the evaluation of the efficacy of antifungal drugs, and may also be used for the study of the immunology of dermatophytoses and of dermatophyte morphogenes

A aderência é considerada como um importante fator de virulência de Candida albicans por determinar a colonização dessas leveduras em diversas regiões do hospedeiro. É a causa inicial da infecção. Neste trabalho estudamos a aderência de C. albicans (sorotipos A e B) em culturas de células Hela e Vero, com leveduras cultivadas por 18 e 30 horas em meio YNB adicionado de fontes de carboidrato como glicose, sacarose, maltose, galactose e manose (500 mM). Cada ensaio foi realizado em triplicata. Os melhores resultados foram obtidos no meio adicionado de glicose. A aderência foi maior em culturas de 18 horas, incubadas a 37ºC no tempo de contato com as células de 1 hora. O estudo da interação entre as leveduras e a cultura de células foi realizado utilizando-se a microscopia eletrônica de varredura.

The adherence of Candida albicans is considered an important virulence factor since it determines the colonization of the yeast in various regions of the host, being the initial cause of the infection. In this work we studied the adherence of C. albicans (serotypes A and B) to HeLa and Vero cells after culture for 18 h and 30 h in chemically defined medium (YNB) plus carbohydrate sources such as glucose, sucrose, maltose, galactose and mannose (500 mM). Each assay was performed in triplicate. The best results were obtained with the medium containing glucose. The adherence was greatest in 18 h cultures at 37ºC and at 1 h contact time. The interaction of yeast cells with the host cells was studied by scanning microscopy.

Neste trabalho, foram estudadas duas cepas de Aspergillus flavus não toxigênica (NRRL 6550) e toxigênica (NRRL 5940). As cepas foram cultivadas durante 44 dias objetivando a pesquisa de partículas semelhantes a vírus (VLPs), por meio de microscopia eletrônica e pesquisa de ácidos nucléicos, através de eletroforese. Somente as cepas toxigênicas continham "VLPs", as quais apresentaram 3 segmentos de RNA de fita dupla. Um aumento no número de "VLPs" foi observado com 12 dias de cultivo, período correspondente a fase exponencial de crescimento de A. flavus.

Two strains of Aspergillus flavus, non-toxigenic NRRL 6550 and toxigenic NRRL 5940, were studied over a period of 44 days, in order to detect the presence of virus-like particles (VLPs) by means of electron microscopy (EM) and nucleic acids electrophoresis. Only the toxigenic strain contained VLPs, presenting three-segmented dsRNA. An increase in VLPs number was observed during the exponential phase of fungal growth, up to day 12 of culture; after this, higher levels of aflatoxin production in toxigenic NRRL 5940 mycelia occurred in parallel with decreased VLPs replication.

A microbiota fúngica de 66 amostras de três híbridos de grãos de milho recém-colhido, provenientes de 3 regiões do Estado de São Paulo - Brasil (Assis, Capão Bonito e Ribeirão Preto), foram analisadas perante a influência dos fatores abióticos (teor de umidade, atividade de água, precipitação pluvial e temperatura média) na frequência de isolamento de fungos, bem como a potencialidade toxigênica das cepas de Aspergillus flavus e Fusarium moniliforme quanto à produção de aflatoxinas e fumonisinas, respectivamente. As análises microbiológicas demonstraram predominância de Fusarium spp., Penicillium spp. e Aspergillus spp. e outros dois gêneros de fungos filamentosos, isolados de grãos com atividade de água entre 0,30 e 0,99 e teor de umidade entre 5,0% e 20,2%. Entre Fusarium spp, F.moniliforme foi a mais frequentemente isolada, enquanto que, em relação ao gênero Aspergillus, predominou A. flavus nas três regiões. Todas as cepas de Fusarium moniliforme isoladas (40), produziram fumonisinas, que variaram de 20 mg/g a 2168 mg/g (FB1) e 10 mg/g a 380 mg/g (FB2). Referente a 10 cepas de Aspergillus flavus isoladas, 6 cepas (60,0%) produziram aflatoxinas, que variaram de 615 mg/kg a 30.750 mg/kg (AFB1) e 11 mg/kg a 22 mg/kg (AFB2).

The mycoflora of 3 hybrids of freshly harvested corn grains collected from three regions of the state of São Paulo, Brazil (Assis, Capão Bonito and Ribeirão Preto) was investigated. A total of 66 samples were analyzed focusing on the influence of abiotic factors (moisture content, water activity, temperature and rainfall) on both the prevalence of Aspergillus flavus and Fusarium moniliforme, and the ability of these genera isolates to produce aflatoxins and fumonisins, respectively. In the three surveyed regions, the fungal population comprised mainly Fusarium spp., Penicillium spp., Aspergillus spp. and 2 others filamentous fungal genera, which were isolated from corn kernels showing water activity of 0.30 to 0.99 and moisture content of 5.0% to 20.2%. Among the genera Fusarium and Aspergillus, the most frequent species were F. moniliforme and A. flavus, respectively. Concerning the toxigenic potential of F. moniliforme, all isolated strains (40) produced fumonisins at 20 mug/g to 2168 mug/g (FB1) and/or 10 mug/g to 380 mug/g (FB2). From the 10 A. flavus isolates, 6 strains (60.0%) produced aflatoxins at 615 mug/kg to 30.750 mug/kg (AFB1) and/or 11 mug/kg to 22 mug/kg (AFB2).

Foram coletadas trinta amostras de arroz em casca, armazenados por 6, 12 e 24 meses em armazéns oficiais situados no Estado do Rio Grande do Sul. Após beneficiamento do produto obteve-se 90 amostras (30 de arroz brunido, 30 de farelo e 30 de palha) nas quais verificou-se a microbiota fúngica, a presença de espécies produtoras de aflatoxinas e a contaminação por aflatoxinas. Os seguintes gêneros fúngicos foram isolados em ágar batata dextrose, em ordem decrescente de freqüência, Aspergillus spp., Nigrospora spp., Penicillium spp.; Fusarium spp.; Mucor spp.; Cladosporium spp.; Trichosporon spp. e fungos não esporulados. O grau de contaminação fúngica (unidades formadoras de colônia/grama de produto) foi baixo no arroz brunido, aumentando progresivamente em amostras de farelo e palha. Entre as espécies de Aspergillus, A. candidus foi isolado com maior frequência seguido de A. flavus. Das cepas isoladas de A. flavus 52,6% foram produtoras de aflatoxinas do grupo B. As análises micotoxicológicas das 90 amostras não revelaram a presença de aflatoxinas nos derivados do arroz.

Thirty samples of rough rice stored for 6, 12 and 24 months in government authorized warehouses of the state of Rio Grande do Sul, Brazil, were simultaneously collected. After milling of the product, 90 samples (30 of polished rice, 30 of rice bran and 30 of rice hull) were evaluated for their mycoflora, aflatoxigenic species and aflatoxin contamination. The following fungi, listed in decreasing order of frequency, were isolated on Potato-Dextrose Agar: Aspergillus spp., Nigrospora spp., Penicillium spp.; Fusarium spp.; Mucor spp.; Cladosporium spp.; Trichosporon spp. and non-sporulated fungi. The degree of fungal contamination (colony forming units per gram of product) was lowest in polished rice, increasing progressively in samples of rice bran and rice hull. Among the Aspergillus species, A. flavus and A. candidus were isolated most frequently. Of the A. flavus isolates, 52.6% strains were found to be toxigenic and produced only Group B aflatoxins. Analysis of the 90 samples did not reveal the presence of aflatoxins in the rice derivatives.

Avaliou-se a produção de aflatoxina B1 pelo Aspergillus flavus IMI 190443, inoculado em sementes de genótipos de amendoim: Tatu Vermelho, VRR-245, 2117 e 2155, in natura e autoclavado a 1210 C por 20 minutos, previamente cultivados no Centro Experimental do Instituto Agronômico de Campinas, em 1995/96. A aflatoxina B1 foi quantificada por cromatografia em camada delgada, utilizando comparação visual com padrões. Os níveis de aflatoxina B1 das amostras autoclavadas e in natura dos genótipos Tatu Vermelho, VRR-245 e 2155 foram significativamente diferentes (p <0,05, Teste de Duncan) quando comparados aos níveis do genótipo 2117. O genótipo 2117, originário da Índia, apresentou independente do processo com e sem aquecimento os menores níveis de aflatoxina B1 em relação aos dos outros genótipos. Os resultados obtidos mostram perspectivas de exploração da resistência varietal no controle da aflatoxina.

The levels of aflatoxin B1 in postharvest peanuts were evaluated after inoculation of seeds of four different genotypes : Tatu Vermelho, VRR-245, 2117 e 2155 with Aspergillus flavus IMI 190443. Field trials were conducted in 1995/96 at the Experimenal Center of the Instituto Agronômico de Campinas. The postharvest seeds were used in natura or autoclaved at 121 oC for 20 minutes prior to inoculation with the mold. The aflatoxin B1 was quantified by thin layer chromatography (TLC) using a visual comparation with standards. The levels of aflatoxin B1 in autoclaved and in natura seeds were significantly different (p < 0,05) between the genotypes Tatu Vermelho, VRR-245, 2155 and the 2117. Samples of genotypes 2117, originating from India, presented the lowest levels of aflatoxin B1 irrespective of heating treatment or not, when compared with the others. The results show possibilities of doing explorations about the varietal resistance in the aflatoxin control.

Padronizou-se método de fluorescência (solução de diacetato de fluoresceína DF e brometo de etídio BE) para análise de viabilidade de células fúngicas, em 40 amostras de liquor, provenientes de casos comprovados de neurocriptococose. A utilização de solução aquosa de saponina a 0,3% eliminou fluorescências interferentes emitidas por hemácias e leucócitos. Após o processamento dos materiais biológicos, foram retiradas alíquotas de 0,1 ml das supensões obtidas e misturadas a volumes iguais da solução DF-BE preparada pouco antes do uso. O tempo de coloração ideal foi de 30 minutos, resultando perfeita diferenciação entre microrganismos viáveis (fluorescência verde) e não viáveis (fluorescência vermelha).

The utilization of the fluorescent method (fluorescein diacetate DF and ethidium bromide BE), to verify the viability of fungal cells, was studied in 40 samples of liquor, from patients with neurocryptococcosis. For removing leukocytes and red blood cells, which produce interfering fluorescence, good results were obtained with 0.3% saponin solution. After processing of liquor, 0.1 ml aliquots of resulting suspension were mixed to equal volumes of fresh DF-BE solution. The best incubation period for staining was 30 minutes, resulting in good differentiation between viable (green fluorescence) and non viable (red fluorescence) cells.